使用步驟
1. 用兩通取代色譜柱將儀器連接，用過濾好的超純水沖洗儀器50ml；
2. 再用分析流動相沖洗儀器50ml，將流速降到0ml/min；
3. 將Xtimate® Sugar-H色譜柱連接在HPLC系統(tǒng)上；
4. 設(shè)置流速在0.2-0.3ml/min直到柱溫達(dá)到設(shè)定值；
5. 在柱溫達(dá)到設(shè)定值時(shí)，流速增至分析流速，流速變化以0.1ml/min為增量，待反壓穩(wěn)定后再繼續(xù)增加流速。zui大流速不應(yīng)使壓力超過1500psi。

流動相要求
常用5 ~10(mmol/L)的硫酸作為流動相。推薦的流動相用去離子的無菌水配制，水應(yīng)去離子化，大于2兆歐的電阻率，水中應(yīng)不含多價(jià)離子，尤其是過渡金屬元素和重金屬離子，使用前需用真空泵通過0.45μm或更小孔徑的濾膜除去細(xì)菌和其它顆粒，溶劑過濾推薦使用溶劑過濾器。

雖然流動相已經(jīng)在真空過濾時(shí)脫氣，但還是應(yīng)該通過以下程序來完全脫氣。如果系統(tǒng)連續(xù)使用不止一天，請將流動相置于錐形瓶中，放在攪拌器/電爐上，用鋁箔封上瓶口以減小蒸發(fā)，用前將流動相燒至沸點(diǎn)幾分鐘，使用時(shí)保持溫度70-90℃。這個(gè)操作能夠保證氣體（尤其是 CO2）不再重新溶解在流動相中，同時(shí)也會防止微生物的滋生。

要保持裝流動相的容器干凈，有蓋，且新鮮，流動相需每24小時(shí)重新配制。

注意事項(xiàng)
通常推薦壓力不超過1500psi；

zui大流速推薦不超過2ml/min(70℃) ；
流動相中有機(jī)相的zui大含量為5%(V/V)，樣品中少量的乙腈，乙醇，甲醇和異丙醇不會影響柱子的性能；
柱子的溫度不要超過95℃。通常高溫會帶來高的分辨率，但在 90-95℃之間幾乎沒有變化，70℃以下對于許多糖，就異構(gòu)體的分離來說不能提供足夠的分辨率，對于乙醇的定量，柱溫應(yīng)在75℃；
柱溫的快速變化不會對柱子帶來什么反作用，如果柱子在60℃以下，那么太高的流速可能引起高柱壓，由于水在低溫時(shí)的高的粘度因此高的流速會帶來很高的反壓；
定期反向沖洗色譜柱（在每5L流動相之后），這將會有效地延長色譜柱的壽命；
流速的變化不能超過0.5ml/min，流速變化應(yīng)該緩慢進(jìn)行，建議改變流速時(shí)以0.1ml/min為增量，直到反壓穩(wěn)定后再繼續(xù)增加流速。任何的流速變化均要在不超過0.5ml/min下進(jìn)行；在溶劑輸出系統(tǒng)中壓力限制的設(shè)定應(yīng)比普通的工作壓力高出幾百psi，從而避免任何儀器未被注意的額外壓力升高。

保存條件
長期保存（72小時(shí)以上不用）。關(guān)掉柱溫箱，待柱子冷卻至室溫，停泵。當(dāng)柱子冷卻后，從系統(tǒng)中移出，換上塑料堵頭，防止保存溶劑揮干，通常的流動相都可作為保存柱子的適宜溶劑。在冰箱中5℃保存（不要冷凍），以防止微生物的滋生；柱子拆掉后要用兩通連接在系統(tǒng)上，先用水沖洗整個(gè)液相色譜系統(tǒng)，然后用甲醇，zui后儀器系統(tǒng)保存在甲醇中。

在關(guān)機(jī)后的重新啟動。當(dāng)開啟帶有一個(gè)柱溫很低的柱子的系統(tǒng)時(shí)，打開柱溫箱，流速開始不要超過0.2ml/min。待系統(tǒng)在此條件下穩(wěn)定至少二十分鐘達(dá)到工作溫度后再按通常的工作條件操作。

整夜的停機(jī)（放置少于72小時(shí)）。柱子留在系統(tǒng)中流速降到0.2ml/min。循環(huán)溶劑，將流出的管路插入流動相瓶中，如果不想開著柱溫箱，那就關(guān)掉柱溫箱讓其冷卻。

在整夜停機(jī)后的開啟。打開柱溫箱，流動相的流速不要超過0.1-0.2ml/min，保持此流速至少二十分鐘直到達(dá)到柱子工作所需溫度，然后再按照通常分析條件來設(shè)置。

故障檢查
Sugar-H是以樹脂的膨脹形態(tài)緊密裝填的，如果樣品進(jìn)行了很好的前處理，那么大部分產(chǎn)生的問題都和樹脂填料有關(guān)，由于單向閥的損壞或是突然地反壓增加，脆弱的樹脂填料可能被泵的波動沖到柱子的后篩板處。反壓的增加是否會發(fā)生，要經(jīng)常檢查在線過濾器以及保護(hù)柱中是否截留了微粒。如果不是此問題，那么很可能是樹脂部分地堵在了出口端的篩板處，檢查這種情況是否發(fā)生需要關(guān)掉泵，將柱子的流路方向反過來，然后泵流速開到0.1ml/min，20分鐘達(dá)到工作溫度后再設(shè)至工作時(shí)的流速。
 

柱子的再生步驟
Sugar-H柱子的再生方法根據(jù)相關(guān)的樣品純度有不同的變化，越是天然物，（尤其是含有那些重金屬和過渡金屬元素或是有機(jī)酸的樣品）越需要經(jīng)常地對柱子進(jìn)行再生，因?yàn)樗鼈儠c柱子發(fā)生置換。
如果利巴韋林的峰有拖尾，那么柱子需要做以下處理:
配制500ml的再生溶液（pH2.5的稀硫酸），把柱子流路方向反過來，在90℃下以0.5ml/min的流速沖洗一整夜。再生之后回到正常方向使用。當(dāng)柱子反沖時(shí)很重要的一點(diǎn)是需要保持溶劑的溫度從而確保正確的沖洗，用冷的溶劑將會延緩沖洗的過程。