在日常分離分析工作中，液相色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要，使用是否得當(dāng)，直接影響液相色譜柱的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操縱過程中，需要留意下列題目，以維護(hù)液相色譜柱。
(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的忽然變化或者使液相色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的忽然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
(4)應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/div>
(5)如使用柱溫控制裝置時，應(yīng)留意在通人活動相后才能升溫。
(6)一般說來液相色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除往留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
(7)選擇使用適宜的活動相，以避免固定相被破壞。有時可以在進(jìn)樣器前面連接一個預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時，預(yù)柱為硅膠，可使活動相在進(jìn)進(jìn)分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
8)避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi)，需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和液相色譜柱之間連接一個保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
(9)經(jīng)常用強溶劑沖洗液相色譜柱，清除保存在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時，對流路系統(tǒng)中活動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種活動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50-75mL。
(10)保存液相色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)布滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。盡對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。
(11)使用過程中，假如壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi)，使柱頭被污染;假如柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。
(12)在完成分離分析工作之后，不應(yīng)立即停機，需及時對色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗，一般0.5h以上，以除往液相色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
